扶梯扶手，
地铁公交的座位，
每天都签收的快递盒子，
甚至是你贴身不离的手机，
都可能潜伏着一个看不见的“杀手”——病毒。
病毒离开人体后，依附在物体表面，在一定时间内仍具备相当的活性。有研究显示，新冠病毒在塑料上可存活近16小时。《美国感染控制杂志》也有论文研究称，甲型H1N1流感病毒在木质表面，可持续48小时保持感染能力。
病毒在不同材料物体表面的生存时间不同，最长可达十几天，最短只有几小时乃至几分钟。但是，短短几分钟已经足够病毒发动一场悄无声息的“袭击”。
面对无孔不入的病毒，采用消毒剂、紫外线消毒机、臭氧消毒机等对物体表面进行全方位无死角消杀，无疑是最高效便捷的办法。但近年来，消毒剂造假、消毒机不合格的报道屡见不鲜。
▲信息摘自各大网络平台
在疫情防控常态化的今天，物体表面消杀工作更是筑牢安全防线的基础，不容有失。但是，消毒剂、消毒机是否有效，物体表面消杀工作是否到位，如何以精准的科学数据来衡量？
//试验原理
通常我们将待测病毒液滴加到载体上，作用规定的时间之后，测试残留的病毒感染滴度，通过对照组和试验组杀灭对数值进行计算其杀灭率。
//参考标准
《消毒技术规范》（版）
GB-《食具消毒柜安全和卫生要求》附录CC
T/GDAR-《空气调节器除病毒、除油性能要求及试验方法》
T/CAS-《家用及类似用途电器的抗病毒、除病毒功能通用技术要求及试验方法》
ASTME-20StandardPracticetoAssessVirucidalActivityofChemicalsIntendedforDisinfectionofInanimate,NonporousEnvironmentalSurfaces
BSEN:Chemicaldisinfectantsandantiseptics.Quantitativecarriertestfortheevaluationofvirucidalactivityforinstrumentsusedinthemedicalarea.Testmethodandrequirements(phase2,step2)
NFT72--Methodsofairbornedisinfectionofsurfaces-Determinationofbactericidal,fongicidal,yeasticidal,mycobactericidal,tuberculicidalsporicidalandvirucidalactivity,includingbacteriophages
//试验准备
制备载片：
将载玻片切割成10mm×10mm大小，高温高压灭菌后烘干备用；
用培养基将病毒液稀释成1×~TCID50/mL，将经灭菌的载体片平铺于无菌平皿内，取10μL滴加到灭完菌的玻片上，置室温下自然阴干后再使用。
注：
阴干后的病毒玻片可以充分模拟生活中被病毒污染的物体表面，未阴干的玻片可能会影响某些消毒方式的消毒效果。
//正式试验
不同的物品表面消毒方式对应的检测方法存在一定差异。
紫外灯类：
首先要确认紫外灯的照射位置，否则照歪了效果就会受影响；
然后将处理好的病毒片置于无菌平皿中，不要重叠；
平皿置于测定架预先确定的照射位置并开始照射，同时设立阳性对照组与阴性对照组；
回收照射后样本送至实验室进行洗脱并通过TCID50法或空斑法测定残留病毒滴度；
注：
阳性对照组，以试验用的同批病毒片置于室温条件下；
阴性对照组，以同次实验用培养基或PBS接种培养基培养，观察有无污染。
便携式消毒设备或传送通道类可用采用这种方法。
消毒箱类：
每次试验选取2片病毒样片为一组，平放于无菌平皿中，勿重叠；
箱内容积过小时，可将病毒直接涂染于所设计消毒的物品表面进行试验，每2件为一组；
根据消毒箱容积的大小，在消毒箱每层的内、外两个点各放一个含2片染有病毒玻片的平皿(大型柜可在内、中、外各放一平皿)，打开平皿盖，或直接涂染的样本，消毒箱内应同时将所设计消毒的物品摆放至使用说明书中规定的最高装载量(即满载状态)；
关闭消毒箱的门(或盖)，按照说明书开启消毒箱，作用至规定时间；
将处理后病毒样片移入含洗脱液的试管中，振荡洗脱后，通过TCID50法或空斑法测定残留病毒滴度。
注：
阳性对照组，以试验用的同批病毒片置于室温条件下；
阴性对照组，以同次实验用培养基或PBS接种培养基培养，观察有无污染。
紫外、臭氧、红外、高温等作用原理消毒箱均可以采用这种方法。
空间物表杀灭类：
将待测样机安置于密闭试验舱内，并调试样机；
将负载病毒的载片放置于试验舱壁的几个点上；
运行待测样机，作用至规定时间后，回收载片进行洗脱并通过TCID50法或空斑法测定残留病毒滴度。
注：
阳性对照组，以试验用的同批病毒片置于对照试验舱内；
阴性对照组，以同次实验用培养基或PBS接种培养基培养，观察有无污染。
紫外、臭氧、过氧化氢、次氯酸消毒机等作用原理均可采用这种方法。
//评判规定
依据《消毒技术规范》（版）,试验重复3次，所设阳性对照组，脊髓灰质炎病毒滴度达(TCID50)，阴性对照细胞无污染，试验组中每次试验病毒滴度下降4个对数值可判定为合格。
▲正常未感染宿主细胞
▲肠道病毒EV71病毒感染后引起宿主细胞病变
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